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賽默飛ABI7900熒光定量PCR儀_生命科學_北京草莓视频懂你更多科技有限公司

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賽默飛ABI7900熒光定量PCR儀

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詳情介紹

ABI7900熒光定量PCR儀是繼7700、5700型熒光定量PCR儀之後,ABI公司新推出的高通量實時熒光定量PCR係統。它兼容96孔板和384孔板的熒光定量PCR儀,也可選手工進樣和自動進樣的熒光定量PCR儀。7900型熒光定量PCR儀可滿足從中通量到高通量實驗的需求。


7900型熒光定量PCR儀的主要特點:


高效平台-7900係統是為支持高通量而構建的, 光學係統經優化以適用於384孔板熒光信號的激活和實時檢測。


結果可靠-7900係統采用了與7700、5700相同的定量原理,利用Ct值(Ct定義為在基線上方產生可檢測到的統計學上顯著的熒光發射的這一PCR循環)和起始拷貝數的對應關係,通過外標準曲線精確計算未知樣品的起始拷貝數。


高度重現性-7900係統的熒光檢測發生在PCR對數期的起始,因此反應管中各組分沒有任何限製反應因素,從而確保檢測結果都是精確並能重複的。


先進的熒光檢測技術-RISM 7900熒光定量PCR係統在不降低速度、分辨率的情況下有效提高了產率,這是基於先進的熒光檢測技術:一束激光掃描並激活384個孔的每一個孔裏的熒光染料,熒光信號通過光柵分光,經過分離的多色熒光同時到達CCD攝像機,實現多色熒光同時檢測。


自動進樣裝置-7900係統配備有自動化配件可取得更高效率。自動化裝置可容納84塊384孔板,機械手臂可按一定順序將待測樣品板運送至主機內,配備的條形碼閱讀器(Bar code reader)可自動識別進入主機的樣品板編號,使你在任何時間可以在樣品行列中插入或替代樣品板。


多樣的化學試劑-7900型熒光定量PCR儀上可使用的化學試劑包括TaqMan熒光探針法和SYBR Green熒光染料法。TaqMan探針法具有高度的靈敏度和特異性,適用於實時定量的多重反應或單核苷酸多態性分析(SNP)。SYBRGreen染料應用於目標鑒定(篩選測定)或者在隻需用少數幾個反應的測定中更為理想。


有效防汙染-7900係統在PCR全過程中使用專門設計的和始終密閉的樣品管。在加入樣品和試劑後這些管子便立即封閉並在擴增和檢測過程中保持這種狀態,這樣就可以大大地減少汙染的機會;此外,7900係統不存在PCR後處理,有效防止擴增產物對實驗環境的汙染而造成的假陽性。


多種定量方法-ABIPRISM 7900序列檢測係統軟件為基因表達提供一種定量化方法。jue對定量是從一個標準曲線上直接測定目標(基因)的量。相對定量方法是通過與標定樣品相比較而計算未知樣品的量,不需要標準曲線。


1.jue對定量


為了測定未知樣品中的目標(基因)的數量,7900係統可用來測定樣品的CT,然後用一條標準曲線來測定起始的拷貝數。在標準曲線的繪製中,7900係統軟件首先用已知的起始拷貝數的幾種稀釋度計算它們的CT值。接著,軟件使用測得的CT值對應於起始拷貝數的對數值作圖。至少在五個數量級範圍中兩者呈線性關係。


2.相對定量


對於基因表達研究來說,相對定量是理想的方法。這裏不是應用標準曲線而是相對於標定樣品計算表達水平。用一個內源對照來標定樣品的量。這一方法與7900係統在一個多重反應中能同時對目標和內源對照進行定量測定的能力相結合,可實現高效、高通量的基因表達研究。


3.有效的SNP檢測手段


除實時定量測定以外,7900係統包括對於已知的單一核苷酸多態性(SNPS)作大規模篩選的軟件。在一對等位基因係統中,用對應於兩個等位基因的兩個TaqMan探針在同一個試管中做多重PCR反應。反應終止時所產生的熒光用7900係統進行測定,實驗結果通過分析軟件迅速取得。


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